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dpph自由基清除率(DPPH抗氧化_化学_自然科学_专业资料)

作者:哪吒游戏网

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DPPH 法 测 定 黄 芩 黄 酮 的 抗 氧 化 活 性 抗氧化就是任何以低浓度存在就能有 效抑制自由基的氧化反应的物质dpph自由基清除率,其作用机理可以是直接作用在自由基,或是间 接消耗掉容易生成自由基的物质,防止发生进一步反应。目前对自由基清除剂的研究方法主要有类, 一类是体外模型,另一类是体内模型,其中 DPPH 法是体外模型中最常用的方法。 DPPH 又称 1,1-二苯基-2-三硝基 苯肼, 是一种很稳定的氮中心的自由基, 他的稳定性主要来自共振稳定 作用的 3 个苯环的空间障碍, 使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能 发挥其应有的电子成对作用。它的无水乙醇溶液呈紫色,在 517nm 波 长处有最大吸收, 吸光度与浓度呈线性关系。 向其中加入自由基清除剂时, 可以结合或替代DPPH· , 使 自 由 基 数 量 减少, 吸光度变小, 溶液颜色变浅, 借此可评价清除自由基的能力。即通过在 517nm 波长处检测样品清除 DPPH· 的效果, 来计算抗氧化能力。 实验研究表明, 黄芩黄酮中清除 DPPH 自由基活性的主要成分是黄芩苷[1], 黄芩苷中含有羧羟基和酚羟基能 与 DPPH 反应,反应式如下:NN+O2NO2NNO2H+NNHO2NO2NNO2 DPPH 与抗氧化剂反应原理 材料:DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼) ;无 水乙醇;仪器:分光光度计 1.DPPH 贮备液的制备 准确称取 DPPH 试剂 3.5mg, 用无水乙醇溶解, 并定量转入 10mL 容量瓶 中, 用无水乙醇定容至刻度, 取 2mL 至 100ml 容量瓶中, 摇匀得浓度为 0.0178mmol/L DPPH 贮备液,置于冰箱中冷藏备用。

2.试液的制备 准确称取 5.2mg 干燥的黄酮提取物 (32.75%),用无水乙醇溶解, 并定 量转入 50ml 容量瓶中,用无水乙醇定量至刻度,取 10ml 至 100ml 容量瓶中,摇匀得浓度为 0.0233mmol/L 试液。 3.DPPH·清除率的测定 在 10mL 比色管中依次加入 4.0mLDPPH 溶液和黄酮提取液,再加入无水 乙醇至刻度,混匀立即用 1cm 比色皿在 517nm 波长处测吸光值(A),吸 光值记为 Ai,再在温室避光保存 30min 后测吸光值,记为 Aj,对照试 验为只加 DPPH 的乙醇溶液dpph自由基清除率,其吸光值记为 Ac。按下式计算自由基清除 率(K):K(%)=[1-(Ai-Aj)/Ac]*100%

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